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PEPCK,BIM大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶elisa试剂盒
品牌名称:
主要产品:
PEPCK,BIM大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶elisa试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的含量。
  PEPCK,BIM大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶elisa试剂盒的详细资料:

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK)的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

PEPCK,BIM大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶elisa试剂盒原理

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

ELISA试剂盒组成

酶标板、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照

四、储存及有效期

于2~8℃避光保存,有效期为12个月。

包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。

二、PEPCK,BIM大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶elisa试剂盒操作步骤

(一)样品准备

1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。

2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如2μl血清加入198μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。

3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

(二)检验方法

1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。

3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。

4.混匀,置37℃反应30分钟。

5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。

6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。

7.洗涤,同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。

三、ELISA注意事项

1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。

2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。

3. 一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。

5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。

6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。

7. 底物请避光保存。

8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

四、ELISA试剂盒优点:

我司共有14000余种ELISA试剂盒物种涵盖Human,Mouse,Rat等,畅销品种具备以下优点:

极高品质—高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础

精确特异—特异检测目标分子,结果精确可重复

高度灵敏—可检测到pg/mL级别的目标

种类齐全—可覆盖人、大鼠、小鼠、棉鼠、猕猴、猪、马、犬和猫等多个种属

优化设计—可拆卸式96孔板(12X8),为血清、血浆、尿样和细胞培养物样本检测进行优化

五、问题解答

Elisa试剂盒阴性对照及阳性对照解析

Elisa试剂盒阴性对照及阳性对照:阴、阳性对照若有正确的结果,对试剂盒操作的结果可以有粗略的判断。

空白对照:对ELISA试剂来说,空白对照实际上是不加标本不加酶做对照。空白对照主要测系统的吸光率。空白对照在单波长测量时显得尤其重要

我司代理几千种ELISA试剂盒,数万种抗体,并代理产品近万种,涉及分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等生命科学研究的各个领域。为了节省您的时间,我们还可以提供代检测服务。

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