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Claudin-1,大鼠封闭蛋白1elisa试剂盒代测
品牌名称:
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Claudin-1,大鼠封闭蛋白1elisa试剂盒代测用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠封闭蛋白1(Claudin-1)的含量。
  Claudin-1,大鼠封闭蛋白1elisa试剂盒代测的详细资料:

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠封闭蛋白1Claudin-1)的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠封闭蛋白1(Claudin-1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠封闭蛋白1(Claudin-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

Claudin-1,大鼠封闭蛋白1elisa试剂盒代测操作方法

竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量成反比。操作步骤如下:

  (1)将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。

  (2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达zui充分的量。洗涤。

  (3)加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原zui多,故颜色zui深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中抗原含量越多。

Elisa间接法、竞争法、捕获法,应用亲和素和生物素的ELISA

亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉亲和素。生物素又称维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟 基琥珀亚胺酯(BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合,虽不属免疫反应,但特异性强,亲和力大,两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置,可以连接更多的生物素化的分子,形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELISA偶联起来,就可大大提高ELISA的敏感度。

Claudin-1,大鼠封闭蛋白1elisa试剂盒代测特点

由于其操作简便,灵敏度高,是蛋白检测技术中应用zui广泛的技术之一。ELISA具有很强的特异性,一种ELISA试剂盒只能检测一种物质,科研中需要检测的物质成千上万,所以需求有成千上万个不同种类的ELISA试剂盒。ELISA的基础是抗原和抗体的匹配,原料的储备至关重要。我们公司已经储备了近四千种的抗原和抗体。

的作用:

1.免疫酶染色各种细胞内成份的定位。

2.研究抗酶抗体的合成。

3.显现微量的免疫沉淀反应。

4.定量检测体液中抗原或抗体成份。
elisa试剂盒载体的外形主要有:

1.微量滴定板、小珠和小试管。

2.固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不介入化学反应。

3.板式及珠式ELISA的标本量一般为100-200ul,而小试管可根据需要加大反应体积,标本反应量的增加有助于试验敏感性的进步。ELISA试剂盒现在已有多种自动化仪器用于微量滴定板型的ELISA检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操纵的尺度化极为有利。

elisa试剂盒的保温

在建立ELISA方法作反应动力学研究时,ELISA检测试剂盒实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃12小时,产物的天生可达顶峰。温育常采用的温度有43℃37℃、室温顺4℃等。室温温育时要平置于操纵台上即可。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,ELISA检测试剂盒一般均采用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。操纵时的室温应严格限制在划定的范围内,尺度室温温度是指2025℃,但详细操纵时可根据仿单的要求控制温育。

elisa试剂盒的安全性:

1.避免人体直接接触显色剂AB和终止液。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2.实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。

3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

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