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IL-27,进口大鼠白细胞介素27elisa试剂盒多少钱
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IL-27,进口大鼠白细胞介素27elisa试剂盒多少钱用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠白细胞介素27(IL-27)的含量
  IL-27,进口大鼠白细胞介素27elisa试剂盒多少钱的详细资料:

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠白细胞介素27IL-27)的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠白细胞介素27(IL-27)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠白细胞介素27(IL-27)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

二、“IL-27,进口大鼠白细胞介素27elisa试剂盒多少钱”的四大特性

1.特异性强:不与其它细胞因子反应。

2.重复性好:板内、板间变异系数均小于10%

3.稳定性高:实验效果很稳定。

4.超灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品,稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990

三、“IL-27,进口大鼠白细胞介素27elisa试剂盒多少钱”具体操作方法

以双抗体夹心法为例展示:

1、双抗体夹心法检测抗原         

操作步骤如下:

1)将特异性抗体与固相载体结合,形成固相抗体。洗涤除去尚未结

合的抗体及一些杂质。

2)加入待测标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。

4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如 HBeAgHBsAghCG AFP等。只要获得针对受检抗原的特异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标所使用的抗体分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。

在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同,如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中 HBsAgAFP 和尿液 hCG 等)时,应注意可测范围的zui高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。

四、客户收集样品要求

  ·客户需提供待检测抗体和包被用抗原。

  ·检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。

  ·样本收集后应立即-20℃保存,若长期保存应-70℃。

  ·样本量的要求:若一个指标做复孔检测应不少于250ul,做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足提供500ul以上。

   ·客户的样本收集后,立即按要求保存,切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与沟通确认。

五、Elisa试剂盒组成

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×瓶 终止液 6ml×

酶标试剂 6ml×瓶 标准品(480ng/L) 0.5ml×

酶标包被板 12 孔×条 标准品稀释液 1.5ml×

样品稀释液 6ml×瓶 10 说明书 

显色剂液 6ml×瓶 11 封板膜 

显色剂液 6ml×1/瓶 12 密封袋 

六、Elisa试剂盒标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

七、操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

240ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

120ng/L 4 号标准品 150μl 号标准品加入150μl 标准品稀释液

60ng/L 3 号标准品 150μl 号标准品加入150μl 标准品稀释液

30ng/L 2 号标准品 150μl 号标准品加入150μl 标准品稀释液

15ng/L 1 号标准品 150μl 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育3分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3

8. 洗涤:操作同5

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

八、“”咨询和订购的方法

  1.可来电向我们直接咨询及订购。

  2.可点击本页上方“交谈”向我司在线人员咨询及订购。

  3.可在本页下方留言栏内留言,我们会在半个工作日内您

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